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针对肝纤维化发病关键基因热休克蛋白47（HSP47）基因构建HSP47-shRNA，初步验证其在NIH/3T3细胞系干预HSP47基因的表达，影响HSP47 mRNA及蛋白水平表达，并观察该细胞功能学变化。 方法 设计HSP47-shRNA模板，并将其分别设计于U6启动子的下游引物，将U6启动子及其下游HSP47-shRNA的模板双链DNA连接入载体，构建HSP47-pGCsi-U6-shRNA...
设计、构建小鼠血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）特异的RNA干扰(RNA interference，RNAi)表达质粒，研究该质粒对小鼠结肠癌CT-26细胞VEGF表达的影响及对CT-26细胞生物学活性的影响，探索结肠癌基因治疗的新途径。方法 ① 筛选、设计、合成3段VEGF mRNA小干扰RNA（small interfere...
大鼠心肌细胞结缔组织生长因子的诱导表达及RNA干扰研究
心肌细胞 结缔组织生长因子 RNA干扰 心肌纤维化
2009/8/25
目的： 探讨心肌细胞对结缔组织生长因子（CTGF）的基础表达及转化生长因子β1（TGF-β1）对其分泌的诱导作用，并进一步研究以RNA干扰(RNAi)技术靶向抑制CTGF对下游纤维化因子的影响。方法: 实验分为以下5组： 组Ⅰ：单纯心肌细胞组；组Ⅱ：TGF-β1诱导组；组Ⅲ：阴性质粒组；组Ⅳ：RNAi组；组Ⅴ：脂质体组。分离培养Sprague Dawley（SD）大鼠乳鼠心肌细胞，以5 μg/L终...
目的: 探讨逆转录病毒介导的乙型肝炎病毒(HBV) X, P单、双靶区的反义RNA在乙型肝炎转基因小鼠肝细胞中HBV复制的影响. 方法: 构建表达HBV X, P双靶区正、反义RNA的重组载体质粒, 与脂质体混合, 注入小鼠体内, 第8周时取小鼠肝脏, 提取肝组织总RNA, 进行逆转录, 将逆转录后的cDNA用PCR扩增, 琼脂凝胶电泳和DNA测序定性, 荧光聚合酶链反应定量; 提取肝组织基因组D...
目的: 研究化学合成经修饰抗金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)小干扰RNA(siRNA)对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的影响及其作用机制. 方法: SD大鼠42只随机平均分成7组：正常组、阴性对照组、假手术组、模型组, 治疗组(分3组, 分别用0.05、0.1、0.2 mg/kg siRNA 尾静脉注射). 以400 mL/L CCl4(3 muL/g) sc诱导大鼠肝纤维化. 8 wk后所有...
大鼠Nogo受体基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定
慢病毒 Nogo受体 RNA干扰
2008/5/15
目的:构建大鼠Nogo受体(Nogo receptor,NgR)基因RNA干扰慢病毒表达载体,并观察其对293T细胞感染效率.方法: 应用基因工程技术,首先构建携带目的基因siNgR199的慢病毒穿梭质粒表达载体,然后使用慢病毒包装质粒混合物和构建好的慢病毒穿梭质粒共转染293T细胞,转染48 h后收集上清离心过滤后冰浴保存,最后进行病毒滴度测定,与标准病毒液分别感染293T细胞,按MO...
目的：筛选能高效干扰大鼠Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4）mRNA的最佳小分子干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）序列。方法：克隆大鼠TLR4基因全长，将TLR4基因与含增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein, EGFP）的质粒pEGFP-C1重组，构建pEGFP-r...
正常及慢性水杨酸钠作用后大鼠耳蜗总RNA的提取和产量
2007/7/28
期刊信息
篇名
正常及慢性水杨酸钠作用后大鼠耳蜗总RNA的提取和产量
语种
中文
撰写或编译
撰写
作者
陈平,肖伯奎,黄治物（通讯作者）,等.
第一作者单位
武汉大学
刊物名称
听力学及言语疾病杂志
页面
30
出版日期
2004年
月
日
文章标识(ISSN)
相关项目
耳鸣产生机制的实验性研究