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东北白鹅CD8α基因的克隆及其胞外区基因的表达与抗血清的制备
东北白鹅 CD8&alpha 基因表达 T淋巴细胞
2015/5/28
根据GenBank公布的绿头鸭CD8α（AF378373）基因序列设计引物，通过RT-PCR获得东北白鹅CD8α基因。根据测序结果设计特异性引物，克隆得到东北白鹅CD8α胞外区基因，并在pET-30a（+）及pET-28a（+）/Rosetta(DE3) pLysS系统中进行原核表达。经IPTG诱导重组蛋白质获得表达，Ni-NTA柱亲和层析获得纯化的重组蛋白质，以纯化的重组蛋白质（pET-30a-...
鸭CD8α基因克隆及不同禽类分子进化分析
鸭 CD8α 克隆 进化
2013/11/29
采用RT-PCR和LD-PCR技术克隆了5个鸭种（金定鸭、樱桃谷北京鸭、番鸭、绿头鸭和斑嘴鸭）CD8α基因编码区序列，结合GenBank中已有禽类（红色原鸡、北京油鸡、斑胸草雀和火鸡）的CD8α序列，采用Jmodeltest最适核苷酸替代模型筛查，使用DAMBE V4.5.2对核苷酸替换(转换/颠换)的饱和性进行检测；并采用最大似然法检测各位点承受的选择压力。测序结果表明，不同鸭种间仅发现少数点突...
【目的】分析比较中国部分品种鸭的CD3ε、CD4和CD8α基因ORF序列,为研究CD3ε链、CD4和CD8α链的结构和功能及其抗体的应用提供依据。【方法】利用RT-PCR,对麻鸭、樱桃谷鸭的CD3ε、CD4和CD8α基因ORF序列克隆测定,应用ClustalX（1.83）和DNAstar生物学软件分别与GenBank上公布的北京鸭CD3ε（AF378704）、CD4（AF378701）和CD8α（...
【目的】分析比较中国部分品种鸭的CD3ε、CD4和CD8α基因ORF序列,为研究CD3ε链、CD4和CD8α链的结构和功能及其抗体的应用提供依据。【方法】利用RT-PCR,对麻鸭、樱桃谷鸭的CD3ε、CD4和CD8α基因ORF序列克隆测定,应用ClustalX（1.83）和DNAstar生物学软件分别与GenBank上公布的北京鸭CD3ε（AF378704）、CD4（AF378701）和CD8α（...
猪CD8α分子基因的克隆与初步鉴定
猪 CD8α 克隆
2009/5/20
[ 目的] 为了研究CD8 分子的生物学功能。[ 方法] 自行设计一对引物, 从猪脾细胞中, 克隆了猪CD8α链基因, 获得大小为700 bp
的基因片段, 并对其进行鉴定。[ 结果] 结果表明, 该基因片段的核苷酸序列与已报道猪的同源性为99 .2% , 与豚鼠、人、猴子、猫和狗的同源性分别为35 .6 % 、55 .7 %、55 .6% 、56 .4 % 和56 .8% 。[ 结论] 该研...
荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平
荧光定量RT-PCR 鸡 CD4 CD8 mRNA
2008/12/1
白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本试验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR（RRT-PCR）方法，并采用该方法对26～50日龄商品鸡外周血淋巴细胞（PBL）中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测。结果显示：所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%；线...