搜索结果: 1-15 共查到“农学 FMDV”相关记录15条 . 查询时间(0.078 秒)
旨在探究宿主蛋白程序性细胞死亡因子10（programmed cell death factor 10，PDCD10）通过抑制Ⅰ型干扰素表达进而促进口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，FMDV）的复制。首先，本研究验证了过表达和沉默PDCD10对FMDV复制的影响，接着利用双荧光素酶报告系统探究PDCD10对Ⅰ型干扰素信号通路活化的影响，最后，利用实时荧光定量PC...
FMDV 2A介导的乳腺上皮细胞双基因表达载体构建及表达
人白细胞介素2 EGFP FMDV 2A 双顺反子
2013/12/3
构建FMDV 2A介导的人白细胞介素2基因（hIL2）和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因双顺反子乳腺特异性表达载体，并验证其在乳腺上皮细胞中的表达。克隆奶山羊β酪蛋白启动子序列，将hIL2基因序列置于启动子之后，然后利用口蹄疫病毒2A（FMDV 2A）自剪切序列连接EGFP基因，构建出乳腺特异性的双顺反子表达载体pFIENβ，并利用脂质体转染山羊乳腺上皮细胞，然后用RTPCR技术和Wes...
【目的】建立检测牛口蹄疫病毒（FMDV）受体亚基αv、β3、β6 mRNA相对转录水平的实时定量PCR方法,分析受体αvβ3和αvβ6在不同器官组织中的转录水平。【方法】在对牛FMDV受体基因克隆和测序的基础上,设计实时定量PCR引物,以GAPDH为内参基因,采用△△Ct 相对定量PCR方法检测分析FMDV受体亚基αv、β3、β6 mRNA在1—2月龄荷斯坦奶牛体内不同器官组织中的转录表达谱。【结...
【目的】建立检测牛口蹄疫病毒（FMDV）受体亚基αv、β3、β6 mRNA相对转录水平的实时定量PCR方法,分析受体αvβ3和αvβ6在不同器官组织中的转录水平。【方法】在对牛FMDV受体基因克隆和测序的基础上,设计实时定量PCR引物,以GAPDH为内参基因,采用△△Ct 相对定量PCR方法检测分析FMDV受体亚基αv、β3、β6 mRNA在1—2月龄荷斯坦奶牛体内不同器官组织中的转录表达谱。【结...
将AsiaⅠ型FMDV全衣壳蛋白P12A基因插入到带有蜂毒溶血肽信号序列的杆状病毒转移载体pMelBac中，构建重组转移载体pMel-P12A。然后将含有目的基因的转移载体与线性化的杆状病毒DNA共转染Sf9细胞，获得重组杆状病毒。以感染复数（MOI）10的重组病毒感染Sf9细胞，72 h后收获细胞，经Western blotting、间接免疫荧光检测，结果表明P12A基因在昆虫细胞中获得表达，相...
FMDV抗原表位与hsp70的融合表达及表达产物对小鼠的免疫应答。
已发现至少有αvβ1、αvβ3、αvβ6、αvβ8 4种整联蛋白是FMDV的细胞受体，αv是4种受体的通用亚基。本试验中从FMDV实验感染猪和牛、健康羊和双峰驼等的肺组织中克隆到了受体通用亚基αv基因，并对其序列进行了比较和进化关系分析。结果显示，羊、牛、猪、双峰驼的αv亚基基因的编码区分别含有3 147、3 147、3 141、3 165个核苷酸，分别编码1 048、1 048、1 046、1 ...
用大肠杆菌表达的FMDV NSP 3ABC经纯化复性后作为抗原，建立了鉴别感染动物与注苗动物的间接ELISA方法。用该方法检测了大量的牛血清样品，确定了3ABC－I－ELISA判定标准。3ABC－I－ELISA以（OD样品－OD阴性）÷（OD阳性－OD阴性）来计算待测样品效价。当效价小于0.2为阴性，介于0.2～0.3之间为可疑，大于0.3为阳性。根据此判定标准所测试验感染动物血清都为阳性，敏感性...
用原位杂交对BHK-21细胞中的FMDV定位和检测
原位杂交 FMDV 探针 BHK-21
2008/4/7
为了明确FMDV在细胞内的增殖部位，建立检测细胞内低拷贝FMDV的方法，对试验接种FMDV O/Akesu/58 （107TCID50）毒株的BHK-21细胞中2~10 h不同时间段的病毒RNA进行检测和定位。选用FMDV RNA非结构蛋白区3D保守序列作为寡核苷酸探针，采用尾段标记法以地高辛-11-dUTP标记， 用原位杂交敏感加强型试剂盒检测杂交体。结果显示，从感染FMDV后2~10 h内的B...
用原位杂交技术对牛组织中FMDV RNA检测和定位
FMDV 原位杂交 牛
2008/3/29
采用原位杂交技术对6头试验牛易感染组织中的FMDV RNA进行了检测和定位。结果显示，接毒后7~28 d 4头牛舌上皮组织、7~21 d的喉咽部有强阳性染色；接毒后35 d的牛及正常对照牛舌上皮没有阳性染色；接毒牛及对照牛的扁桃体、淋巴结和蹄叉等其他组织中均没有阳性染色，表明牛舌上皮和喉咽部上皮组织中感染了FMDV，本研究为进一步阐明FMDV在宿主体内的持续感染机理提供极有价值的线索。
用原位杂交技术对牛组织中FMDV RNA检测和定位
FMDV 原位杂交 牛
2013/12/10
采用原位杂交技术对6头试验牛易感染组织中的FMDV RNA进行了检测和定位。结果显示，接毒后7~28 d 4头牛舌上皮组织、7~21 d的喉咽部有强阳性染色；接毒后35 d的牛及正常对照牛舌上皮没有阳性染色；接毒牛及对照牛的扁桃体、淋巴结和蹄叉等其他组织中均没有阳性染色，表明牛舌上皮和喉咽部上皮组织中感染了FMDV，本研究为进一步阐明FMDV在宿主体内的持续感染机理提供极有价值的线索。
用原位杂交对BHK-21细胞中的FMDV定位和检测
原位杂交 FMDV 探针 BHK-21
2013/12/11
为了明确FMDV在细胞内的增殖部位，建立检测细胞内低拷贝FMDV的方法，对试验接种FMDV O/Akesu/58 （107TCID50）毒株的BHK-21细胞中2~10 h不同时间段的病毒RNA进行检测和定位。选用FMDV RNA非结构蛋白区3D保守序列作为寡核苷酸探针，采用尾段标记法以地高辛-11-dUTP标记， 用原位杂交敏感加强型试剂盒检测杂交体。结果显示，从感染FMDV后2~10 h内的B...
为研究Asia 1型口蹄疫病毒（FMDV）感染BHK-21细胞后蛋白质组的变化及差异,将FMDV接种于培养的单层BHK-21细胞，同时设未接毒的BHK-21细胞作对照组。待细胞病变后分别提取2组细胞总蛋白借助2DE技术及PDQuest8.0软件进行细胞蛋白质组二维电泳图谱差异性分析。结果显示感染组有1 457个可见蛋白质点，而对照组可见的蛋白质点为1 427个。感染组蛋白点的表达量与对照组相比，...
筛选靶向FMDV受体猪源整联蛋白αV亚基基因抑制FMDV复制的最佳siRNA。根据猪源αV mRNA 序列，设计并合成siRNA， Lipofectamine 2000转染siRNA于PK15细胞，利用qRTPCR检测RNAi组(iαV480、iαV1719和iαV2077)、空白组(Mock)和阴性对照组(Control)中αV mRNA表达情况；在转染siRNA12 h后通过接种10...