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利用膜蛋白酵母双杂交系统构建人尿道上皮细胞cDNA文库
膜蛋白酵母双杂交 人尿道上皮细胞 cDNA文库
2018/10/16
利用基于分离的泛素介导的膜蛋白酵母双杂交技术,构建人永生尿道上皮细胞(SV-HUC-1)cDNA文库。Trizol法提取人尿道上皮细胞总RNA,并分离纯化其mRNA；以mRNA为模板,合成cDNA第一链、第二链；通过T4 DNA聚合酶将DNA链两端加上5′接头；并将其大于1 kbp的片段与膜蛋白酵母双杂交载体pPR3-N连接,经电转化大肠杆菌感受态细胞,以构建基于分离的泛素介导的膜蛋白酵母双杂交c...
为研究Akt基因在中华绒螯蟹蜕壳前后肌肉生长过程中的功能，应用RACE技术克隆得到编码中华绒螯蟹Akt(命名为EsAkt)的全长为2 200 bp的cDNA序列，包括159 bp的5'非翻译区(5'-UTR)、496 bp的3'非翻译区(3'-UTR)和长度为1545 bp编码514个氨基酸的编码序列。蛋白质结构域分析显示EsAkt含有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族的3个特征性保守结构域。多序列比对和...
以大白菜pol型细胞质雄性不育系16C14花蕾为试验材料, 采用SMART (switching mechanism at 5′ end of RNA transcript)技术合成cDNA, 利用DSN (duplex-specific nuclease)对所得cDNA进行均一化处理, 之后与pDONRTM/Zeo载体重组并转化DH10B大肠杆菌菌株, 构建了大白菜pol型雄性不育花蕾均一化cD...
Expression and processing of xanthin dehydrogenase/oxidase cDNA from African cape buffalo
Biological sciences Xanthin dehydrogenase Syncerus caffer Trypanosome Cape buffalo
2015/1/28
Our lab studies oxidative regulation in defense against extracellular pathogens, especially African Trypanosomes. ^ Trypanosomes are protozoan hemoflagellates. The organisms are transmitted by tsetse ...
根据本实验室前期获得的脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda) α2-巨球蛋白基因EST序列，采用cDNA末端快速扩增(Rapid amplification of cDNA end, RACE)技术克隆获得脊尾白虾α2-巨球蛋白基因cDNA全长，命名为Ecα2M基因。该基因全长4823 bp，由4413 bp的开放阅读框、64 bp的5端非编码区以及346 bp...
采用RACE方法克隆得到了凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的F0-ATP合酶b链基因的全长cDNA序列。生物信息学分析显示，该基因开放阅读框744 bp，编码248个氨基酸，分子量为28.2 kDa。Blast比对结果显示，克隆得到的cDNA序列所编码的氨基酸序列与海虱(Caligus clemensi) F0-ATP合酶β亚基的同源性为50%，与黑腹果蝇(Drosophil...
昆虫错综复杂的嗅觉系统在昆虫寻找寄主、 交配、 产卵以及逃避行为中起到了至关重要的作用。因此，对昆虫嗅觉感受机理的研究将有助于揭开昆虫感受和识别环境中的气味物质并引起相关行为反应的秘密。为了更多地了解华北大黑鳃金龟Holotrichia oblita Faldermann 嗅觉相关蛋白互作机制，本实验利用DUALhunter Starter Kits酵母双杂交筛选试剂盒，构建了华北大黑鳃金龟气味结...
目的筛选和鉴定广州管圆线虫未知基因序列，丰富该虫的基因序列数据，为寻找诊断或药物靶点分子提供实验依据。方法构建广州管圆线虫IV期幼虫cDNA噬菌体文库，随机挑选单个噬菌斑，提取噬菌体DNA进行PCR，扩增其插入的cDNA片段并对PCR产物进行序列测定；采用生物信息学方法对表达序列标签（expressed sequence tags，EST）序列进行分析。结果获得了51条广州管圆线虫基因的EST序列...
棉纤维强度主要由棉纤维次生壁加厚期决定. 以陆地棉品种中棉所8号和海岛棉品种Pima90-53建立的包含109个单株的种间杂交F2群体为材料, 用cDNA-AFLP对棉纤维发育次生壁加厚期(20~25 DPA)基因表达谱进行剖析, 并构建了次生壁加厚期转录组图谱. 37对AFLP引物组合共检测到138个多态性表达片段(transcript-derived fragments, TDFs), 大小在...
大弹涂鱼aanat2基因cDNA克隆及其在生殖季节的表达
大弹涂鱼 芳基烷基胺-N-乙酰转移酶基因亚型2 克隆表达 生殖季节
2013/11/28
克隆获得编码大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)芳基烷基胺-N-乙酰转移酶亚型2(arylalkylamine N- acetyltransferase-2,AANAT2)的cDNA序列,其核苷酸长度为630 bp,可编码209个氨基酸.运用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术,检测了生殖季节大弹涂鱼脑组织中芳基烷基胺-N-乙酰转移酶基因亚型2(aanat2)...
为了研究桔小实蝇Bactrocera dorsalis气味结合蛋白(odorant-binding proteins, OBPs)参与其嗅觉识别过程中的功能及其与植物气味的结合特性， 本研究克隆了桔小实蝇的一个气味结合蛋白基因， 命名为BdorOBP2（GenBank登录号为KC773766）， 并对该基因进行了原核表达。BdorOBP2开放阅读框长447 bp， 编码148 个氨基酸， 具有典型...
酚氧化酶是黑色素合成和昆虫免疫的关键酶， 通常以无活性的酚氧化酶原形式存在。为给黄粉虫Tenebrio molitor遗传分化和免疫防御研究提供参考， 本研究采用PCR和RACE技术克隆了黄、 黑两种色型黄粉虫幼虫的酚氧化酶原基因Tm-ppo， 对其cDNA序列及其推导的氨基酸序列进行生物信息学分析， 采用实时荧光定量PCR检测其在两种色型黄粉虫不同发育阶段mRNA表达水平上的动态变化。
卵黄原蛋白受体（vitellogenin receptor， VgR）是卵黄原蛋白被卵母细胞摄取的关键因子， 在卵黄发生和卵母细胞发育等生理过程中发挥着重要作用。为探讨烟粉虱Bemisia tabaci VgR的功能， 我们采用RT-PCR和RACE等技术扩增了烟粉虱MEAM1隐种B. tabaci Middle East-Asia Minor 1 (MAEM1) 的VgR基因cDNA 全长序列。...
昆虫卵黄发生及其内分泌调控机理一直是昆虫生殖生理学的研究热点。由保幼激素代谢通路关键分子介导的调控系统是影响昆虫卵黄发生的关键途径。研究激素代谢通路关键调控因子的功能将为明确生殖调控机理提供理论依据。保幼激素酯酶 (juvenile hormone esterase, JHE) 是降解昆虫体内保幼激素的关键酶之一， 具有调控昆虫发育、 变态和生殖等功能。本实验以烟粉虱Bemisia tabaci ...
柑橘木虱酵母双杂交cDNA文库的构建及评价
柑橘木虱 柑橘 黄龙病 酵母双杂交cDNA文库 膜蛋白 蛋白质互作
2013/9/12
为了探索研究柑橘木虱Diaphorina citri与柑橘黄龙病（Huanglongbing， HLB）病原菌的相互作用蛋白， 本研究运用RNA转录中5′末端转换机制（Switching Mechanism at 5′ End of the RNA Transcript， SMART）技术构建了柑橘木虱的酵母双杂交cDNA文库。以实验室饲养的柑橘木虱为材料， 提取总RNA， 经反转录后合成ds c...