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本发明涉及分子生物学领域，具体公开了用于基因转录激活的药物诱导型CRISPR/Cas9系统。所述药物诱导型CRISPR/Cas9系统包括靶向特定基因位点的16？22nt sgRNA和如下(一)～(三)中的任意一种载体/载体组合：(一)表达融合蛋白dCas9？(ERT2)n？ADs或dCas9？ADs？(ERT2)n的载体；(二)表达融合蛋白dCas9？(NLS)m或dCas9？(ERT2)n和MC...
本发明涉及分子生物学领域，具体公开了一种用于基因组编辑的药物诱导型CRISPR/Cas9系统，包括靶向特定基因位点的16？22nt的sgRNA和Cas9融合蛋白，所述Cas9融合蛋白由Cas9和与其C端串联的2？5个ERT2组成，所述Cas9和串联的ERT2之间插入1个或2？10个串联的NES。本发明经过一系列试验探究，开发并优化出了具有最高活性和最低背景活性的方案，将之应用于内源基因的编辑。此外...
中国林业科学研究院华北林业实验中心开发出精准性高的小型化Cas9基因编辑工具（图）
精准性高 小型化 Cas9基因 编辑工具
2023/11/20
RNA引导的CRISPR-Cas9系统被广泛应用于哺乳动物细胞的基因组编辑，在基因遗传病的治疗中展现出巨大的发展潜力。限制基因编辑工具应用的主要因素包括编辑活性、PAM限制、蛋白大小、特异性问题等。识别NGG PAM的SpCas9编辑活性高，是最常用的基因编辑工具。但SpCas9特异性较差，使用时往往伴随大量的有害突变。且当SpCas9用于基因治疗时，SpCas9太大无法被单个AAV递送。SaCa...
中国科学院微生物研究所专利：基于CRISPR/Cas9和酿酒酵母细胞内源的同源重组的分子克隆方法
中国科学院微生物研究所 专利 CRISPR/Cas9 酿酒酵母细胞 同源重组 分子克隆方法
2023/8/26
中国科学院微生物研究所专利：基于CRISPR/Cas9和酿酒酵母细胞内源的同源重组的分子克隆方法
CRISPR/Cas9是源自细菌获得性免疫系统的新一代基因编辑技术，在化学生物学、生物医学及基因治疗中具有潜在应用前景。CRISPR/Cas9技术使用引导RNA(single-guide RNA，sgRNA)识别靶标基因，并招募Cas9核酸酶对基因组进行切割、编辑等操作。然而，由于sgRNA识别基因组存在非特异性结合作用，现有CRISPR/Cas9技术应用于基因编辑时存在一定的脱靶效应，且缺乏对疾...
线粒体是细胞的能量代谢枢纽和信号转导交汇站，其功能异常往往会影响高耗能的组织器官（如神经和肌肉组织），也与其他细胞功能如抗病毒效应等密切相关。线粒体DNA（mitochondrial DNA, mtDNA）是线粒体中独立于核基因组的一套遗传物质。mtDNA突变被发现与包括神经退行性疾病、耳聋、肌肉萎缩等多种疾病相关，目前这类线粒体突变导致的疾病在治疗方面充满挑战。
新疆野苹果（Malus sieversii）是我国珍贵的第三纪孑遗植物，也是世界栽培苹果(Malus domestica)的祖先种，具有丰富的抗性基因资源价值。近年来由于农田开发、过度放牧、人为砍伐、苹果小吉丁虫危害及腐烂病爆发等原因，新疆野苹果种群面积急剧减少，已被列为国家二级濒危保护植物。新疆野苹果保育及抗性基因资源挖掘利用迫在眉睫。由于新疆野苹果的自交不亲和性和较长的幼龄期，常规的育种方法很...
CRISPR/Cas9基因编辑技术被认为是治疗各种单基因遗传性疾病的最有希望的策略之一。在最近发表于《Molecular Therapy》杂志上的一项研究中，来自意大利费拉拉大学的Alessia Finotti教授等人首次通过CRISPR / Cas9基因编辑技术对β039地中海贫血突变进行了校正。结果证明，在对来自纯合的β039地中海贫血患者的红系前体细胞进行CRISPR / Cas9校正后，能...