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搜索结果: 1-15 共查到知识库 家畜生物化学相关记录342条 . 查询时间(3.859 秒)
为了解gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞生物学行为的影响,将人工合成的gga-miR-155模拟物、gga-miR-155抑制物以及阴性对照瞬时转染MDCC-MSB1细胞。然后采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测MDCC-MSB1细胞中gga-miR-155的表达水平,CCK-8法检测转染后细胞增殖能力的变化,流式细胞术检测MDCC-MSB1细胞的细胞周期与凋亡的变化,Tra...
本研究旨在预测和鉴定鸡基质蛋白3(matrin 3,MATR3)的核定位信号(nuclear localization signal,NLS)。通过核定位信号在线预测软件预测鸡MATR3蛋白中存在的假定NLS (putative NLS,pNLS),根据预测结果构建鸡MATR3蛋白pNLS缺失的重组真核表达载体,转染细胞后通过观察缺失体重组蛋白的亚细胞定位来确定其NLS。根据鸡MATR3蛋白NLS...
为了研究噬菌体Bp7蛋白gp38在噬菌体吸附宿主菌过程中的作用,PCR扩增gp38基因,对gp38蛋白氨基酸序列特征进行分析和同源性比对,构建重组表达质粒pColdTF-gp38,在E.coli BL21中诱导表达,SDS-PAGE电泳和Western blot检测重组蛋白gp38的表达;亲和层析法纯化蛋白,制备gp38多克隆抗体。免疫电镜检测gp38在噬菌体Bp7表面的定位,蛋白竞争试验和抗体阻...
旨在讨论饲粮中过量维生素A对育成期水貂生长性能、营养物质代谢及血清生化指标的影响。本研究采用单因素随机试验设计,选择雄性水貂90只,随机分成6组,每组15个重复,维生素A添加水平分别为0(对照组)、5 000(Ⅰ组)、20 000(Ⅱ组)、80 000(Ⅲ组)、320 000(Ⅳ组)及1 280 000 IU·kg-1(Ⅴ组)(干物质基础)。预饲期7 d,正式试验期60 d。正式期开始第30天每组...
为了探索β-葡聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞(ruminal epithelial cells,RECs)β-防御素-1(sheep β-defensin-1,SBD-1)表达的影响。本研究首先建立绵羊RECs培养体系作为体外试验模型,用不同浓度(0、5、10、20、50和100 μg·mL-1)的β-葡聚糖刺激RECs 8 h后,利用qPCR和ELISA方法检测RECs中SBD-1的表达变化,选出诱导S...
旨在探究丝氨酸蛋白酶35(serine protease 35,PRSS35)在牛卵泡颗粒细胞(granulosa cells,GCs)中的表达及功能。采用B超超声波检测确定牛优势卵泡(dominant follicle,DF)与从属卵泡(subordinate follicles,SF),分离优势卵泡与从属卵泡颗粒细胞;利用qRT-PCR和Western blotting技术检测PRSS35在D...
旨在研究miR-487b-3p对小鼠C2C12细胞增殖与分化的具体调控机制。本研究以小鼠成肌细胞系(C2C12)为研究对象,利用qRT-PCR检测miR-487b-3p在小鼠各组织和C2C12细胞增殖与分化过程中的表达情况;通过转染miR-487b-3p mimics和miR-487b-3p inhibitor后,利用qRT-PCR检测转染效率,并采用qRT-PCR和Western blottin...
旨在研究促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)对母猪肝中葡萄糖代谢相关酶转录表达及活性的影响,以探讨应激状态下肝调节血糖水平的分子机制。本研究选取9头健康经产断奶苏淮母猪,随机分成处理组(5头)和对照组(4头)。对处理组母猪注射外源ACTH,对照组母猪注射生理盐水;每天处理3次,连续7 d。试验期间每天采集母猪血液;试验结束后,取母猪肝组织。利用放射免...
旨在建立简单、快速的检测体外酶促合成的c-di-GMP和cGAMP的方法。本研究以含有T7启动子、VC2 GEMM-1核糖开关序列或其突变序列VC2/g20a、spinach2和tRNA序列的双链DNA为模板,利用T7 RNA聚合酶体外转录体系制备VC2、VC2/g20a RNA适配体。通过检测绿色荧光强度分析RNA适配体对c-di-GMP和cGAMP的结合能力。结果表明,转录得到的RNA经过加热...
旨在揭示培育品种-苏太猪(杜洛克×梅山猪)F18大肠杆菌抗性的调控通路和重要候选基因,同时进一步探究中外猪品种F18大肠杆菌抗性调控遗传基础的差异。本研究以课题组前期获得的苏太猪和梅山猪F18大肠杆菌抗性型与敏感型断奶仔猪全同胞个体为研究对象,通过转录组测序筛选苏太猪F18大肠杆菌抗性相关的调控通路以及重要候选基因,并在细胞水平,利用qPCR和Western blot分析F18大肠杆菌刺激小肠上皮...
采用高通量测序研究乳酸链球菌素(Nisin)对腹泻小鼠肠道菌群结构的影响。通过腹腔灌注E.coli O1建立腹泻病小鼠模型,通过动物体内保护率试验筛选出最佳药物剂量,将小鼠随机分为空白对照组、阴性对照组、氨苄青霉素、盐酸环丙沙星组和Nisin组。连续灌胃15 d,收集盲肠粪便,采用高通量测序对5组样品进行分析。结果表明:1)E.coli O1可使腹泻小鼠十二指肠绒毛断裂;Nisin可增加淋巴细胞百...
为了探讨骨保护素(osteoprotegerin,OPG)对破骨细胞及其前体自噬与凋亡的影响,本研究以RAW264.7细胞诱导分化形成的破骨细胞(osteoclasts,OCs)及其前体(osteoclast precursors,OCPs)为研究对象,通过自噬促进剂雷帕霉素(rapamycin,RAP)或自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)分别预处理1 h和30 min后,再添加80 ...
本研究旨在探讨猪肺泡巨噬细胞传代细胞系3D4/21中转化生长因子β1(TGF-β1)表达和纤连蛋白(Fn)/α5整合素与副猪嗜血杆菌侵入的关系。通过吸附/侵入试验选择副猪嗜血杆菌最佳吸附/侵入条件;运用荧光定量PCR和ELISA方法检测副猪嗜血杆菌感染细胞后对TGF-β1表达的影响;用TGF-β1预处理3D4/21细胞后,用CFU检测TGF-β1表达对副猪嗜血杆菌侵入的影响;用流式细胞术检测副猪嗜...
为了研制抗氧化中药多糖制剂,比较了枸杞多糖(LBP)、白术多糖(AMP)和当归多糖(CAP)对鸡胚肝细胞(CEL)的抗氧化能力的影响,以维生素C(VC)为对照。首先测定了4个药对CEL的安全浓度,然后取安全浓度范围内3种浓度的各药分别加入到CEL的培养体系中,培养24 h后加入H2O2攻击1 h,测定细胞活力(A570 nm)、细胞内ROS含量、GSH-Px和SOD的活性。结果显示,H2O2组的A...
构建猪肺炎支原体P97蛋白的酵母随机展示文库,并利用该文库筛选和鉴定P97蛋白上的特异性B细胞表位。设计特异性引物从Mhp基因组中扩增p97基因,通过PCR方法将基因内部的TGA密码子突变为TGG,用DNaseⅠ将p97突变基因随机消化成长度100~250 bp的片段,回收产物经3'端加A处理后与用XcmⅠ酶切的酵母表达载体pCT-XcmⅠ连接,将连接产物转化酿酒酵母EBY100获得P97蛋白酵母...

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