搜索结果: 31-45 共查到“知识库 家畜病毒学”相关记录1174条 . 查询时间(1.781 秒)
为了在体外获得表达量高、储存容易、成本低且免疫活性高的H9N2亚型HA蛋白，利用水稻胚乳表达系统表达HA蛋白。首先，将HA基因根据水稻偏好密码子进行优化，合成到pUC57载体上，通过双酶切、连接将HA基因先后构建到中间载体pMP3和植物表达载体pCAMBIA1300上；再通过电极法将pCAMBIA1300-HA导入到根癌农杆菌EHA105中；然后用农杆菌侵染TP309水稻愈伤组织；最后经潮霉素筛选...
应用G3BP1稳转细胞系监测应激状态下的应激颗粒形成
G3BP1 应激颗粒 新城疫病毒 病毒感染
2021/3/12
哺乳动物细胞受到应激刺激后，会在细胞中形成致密的颗粒状结构，该结构被称为应激颗粒（stress granules，SG），其中G3BP1是应激颗粒重要的组成成分和标志蛋白。为了动态监测SG的形成情况，构建稳定表达GFP-G3BP1蛋白的HeLa细胞系。首先，扩增G3BP1基因，并将其克隆到慢病毒载体中，从而获得重组质粒Lenti-GFP-G3BP1，利用三质粒慢病毒包装系统包装为表达GFP-G3B...
旨在对鸡传染性支气管炎病毒（IBV）H120株S1蛋白的B细胞及T细胞可能的表位进行预测并合成相应的多肽，然后免疫小鼠，并分析其免疫效果，以验证候选表位多肽的免疫原性。利用表位预测软件筛选并化学合成针对IBV H120株S1蛋白的5条表位多肽，然后免疫小鼠，通过间接ELISA、中和试验和流式细胞技术检测各表位多肽诱导的特异性抗体、中和抗体和外周血T细胞亚群。ELISA检测结果显示，5条表位多肽均具...
长链非编码RNA——病毒与宿主相互作用中的新型调控因子
长链非编码RNA 病毒 天然免疫 病原识别受体
2021/3/11
长链非编码RNA（long non-coding RNAs，lncRNAs）是一类长度>200 nt的非编码RNA，在多种生物学过程中发挥重要调控作用。近年来研究表明，lncRNAs可被病毒诱导表达，其作为一类新型的调控因子介导宿主与病毒相互作用，通过病原识别受体，以不同机制激活或抑制天然免疫应答反馈病毒感染。本文阐述了lncRNAs介导病毒与宿主相互作用中的调控机制，归纳了它们在宿主抗病毒天然免...
非洲猪瘟病毒强免疫原性重组CD2v抗原的制备与初步应用
非洲猪瘟病毒 CD2v蛋白 强免疫原性抗原 初步应用
2021/3/11
旨在获得非洲猪瘟病毒（ASFV）强免疫原性重组CD2v抗原，利用生物信息学软件进行CD2v抗原指数分析，将其细胞质内免疫显性区与类弹性蛋白多肽（ELP）在重组大肠杆菌中进行融合表达，对ELP-CD2v融合蛋白的相变循环（ITC）条件进行优化，在优化条件下进行融合蛋白纯化，利用烟草蚀纹病毒（TEV）蛋白酶活性包涵体切除ELP标签，通过免疫转印法对重组CD2v抗原进行鉴定，利用重组CD2v抗原建立EL...
猪瘟疫苗免疫是我国猪瘟防控的核心，猪瘟病毒抗体ELISA检测是进行免疫效果评价的最常用手段。中国兽医药品监察所国家/OIE猪瘟参考实验室（以下简称：参考实验室）承担了国家认证认可监督管理委员会（以下简称“认监委”）组织的A类能力验证项目“猪瘟诊断检测技术”（CNCA-19-A01），全面考察和评价我国动物疫病检测机构对猪瘟病毒抗体的检测能力。参考实验室负责制备检测样品，并进行随机编号。向每个参试实...
1株猪源H9N2亚型流感病毒的分子特征
猪流感病毒 H9N2 分子特征 血清学
2021/3/12
旨在进一步了解山东省猪流感的流行情况及其病原特征，笔者于2019年春季，在山东省泰安某屠宰场采集130份猪鼻拭子，进行病毒分离鉴定；并对分离病毒进行全基因组测序和分子特征分析；用禽H9N2亚型标准抗原联合血凝抑制方法检测2018—2019年从山东省8个地区猪场采集的1 527份猪血清样品中的猪流感病毒抗体。结果显示：分离到1株H9N2亚型流感病毒，命名为A/swine/Shandong/TA009...
淋巴细胞信号活化分子（SLAM）是小反刍兽疫病毒（PPRV）在淋巴细胞的主要受体。本研究旨在探索PPRV感染细胞源外泌体对山羊SLAM表达的影响。通过荧光定量PCR法、流式细胞术和Western blot技术检测PPRV疫苗毒株N75-1感染山羊外周血单核细胞（PBMCs）源外泌体（Exo-PPRV）共育对接纳细胞（正常山羊PBMCs）中SLAM表达水平和细胞因子分泌水平的影响。结果表明，与正常细...
研究乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）感染后小鼠原代神经元细胞miRNA的表达谱差异，初步探讨JEV与宿主在miRNA水平的相互作用。分别提取JEV感染48 h后的小鼠原代神经元细胞和未染毒组细胞，高通量测序分析miRNA的表达谱并进行差异分析，选取显著差异表达的miRNA进行实时定量PCR验证。结果筛选出26个差异表达显著的miRNA，其中，18个表达...
一株牛病毒性腹泻病毒BVDV-GSLY的分离鉴定
牛病毒性腹泻病毒 BVDV-GSYL株 分离 鉴定 进化分析
2021/4/7
为了解甘肃地区牛病毒性腹泻病毒的流行情况及其分子特征，通过RT-PCR方法对甘肃地区某规模化养牛场的牛腹泻粪便样品进行了BVDV鉴定。将鉴定为BVDV阳性的牛腹泻粪便样品处理后接种到牛肾传代细胞（MDBK）进行病毒的分离，并通过RT-PCR、免疫荧光检测及病毒基因序列测定对分离的病毒进行鉴定及遗传进化分析。结果表明，成功分离到一株牛源BVDV，命名为BVDV-GSLY株；BVDV-GSLY毒株接种...
本试验的目的是建立更加灵敏的检测牛冠状病毒（BCoV）的RT-PCR方法，并对川西北草原牦牛病料进行BCoV病原检测。选择BCoV聚合酶基因Nsp7-Nsp9片段设计引物，通过反应条件和体系优化，建立检测BCoV的RT-PCR方法并应用于临床样本检测。结果显示：所建方法特异性和重复性好，灵敏性达到1×10-2 pg·μL-1；该方法对肉牛和牦牛BCoV都有良好的检测效果，优于比较的两种以BCoV ...
硫酸小檗碱对猪轮状病毒感染的IPEC-J2中TGF-β1、EGFR、EGF、IGF1 mRNA表达的影响
硫酸小檗碱 仔猪肠黏膜上皮细胞 猪轮状病毒 实时荧光定量PCR TGF-β1 EGFR EGF IGF1
2019/1/16
利用猪轮状病毒（PoRV）感染仔猪肠黏膜上皮细胞（IPEC-J2）建立损伤模型，研究硫酸小檗碱（BS）对PoRV感染的IPEC-J2中TGF-β1、EGFR、EGF、IGF1基因mRNA表达的影响。通过构建目的基因和内参基因的重组质粒，绘制荧光标准曲线，采用实时荧光定量PCR法测定BS对PoRV感染的IPEC-J2中TGF-β1、EGFR、EGF、IGF1 mRNA表达的影响。结果显示：PoRV能...
北京地区猪圆环病毒3型感染的检测及基因组遗传变异分析
猪圆环病毒3型 全基因 遗传分析
2019/1/16
旨在了解北京地区猪圆环病毒3型（porcine circovirus type 3，PCV3）的流行现状、分子生物学特征和遗传变异规律，为PCV3的防控提供参考依据。采集北京地区规模化养殖场73份临床表现为繁殖障碍和呼吸系统疾病的组织样品，对其中的PCV3进行检测和测序。根据PCV3全基因组序列设计3对特异性引物，从患PDNS的断奶仔猪内脏组织中扩增PCV3全基因序列片段，克隆到pMD19-T载体...
猪戊型肝炎病毒血清抗体间接ELISA检测方法的建立与应用
猪戊型肝炎病毒 间接ELISA 抗体 ORF2蛋白
2019/1/16
由于猪戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）可跨种属感染人，因此，猪群中猪HEV感染的监测对于该病的防控和公共卫生都具有重要的意义。本试验旨在建立一种检测猪HEV抗体的间接ELISA方法，以原核表达纯化截短的猪HEV衣壳蛋白为包被抗原，优化条件，确定最佳试验条件，并分析该方法的敏感性、特异性、重复性，以及与商品化试剂盒的符合率，评价其临床应用价值。SDS-PAGE和Wester...