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中国科学院深圳先进技术研究院声镊转染技术为细胞治疗提供新工具(图)
细胞 治疗 免疫
2024/6/23
癌症严重危害人民的生命健康,嵌合抗原受体T 细胞(CAR-T)免疫疗法是最具前景的肿瘤疗法之一,被誉为“癌症治疗的第四次革命”。细胞转染是CAR-T细胞治疗的关键技术,通过基因转导的方法转染患者的T细胞,表达嵌合抗原受体,使得患者的T细胞被“重编码”后,能够特异性识别肿瘤细胞,从而进行选择性杀伤,细胞转染直接影响了CAR-T的疗效和安全性。
旨在构建敖汉细毛羊BMP6、BMPR1B基因的过表达载体,而后将其导入成纤维细胞,分析转染后两基因mRNA、蛋白表达量的变化及基因间相互作用对毛囊的影响。选择40日龄敖汉细毛羊胎羊,采集组织样品,提取RNA后反转录成cDNA,通过PCR反应后利用SoSo试剂盒将纯化的目的片段与表达载体pcDNA3.1连接。酶切鉴定正确后,转至大肠杆菌DH5α感受态细胞,振荡培养并挑取单菌落扩大培养。提取质粒后将p...
旨在利用同源重组构建敖汉细毛羊Hoxa5、BMP6基因表达载体及共转染成纤维细胞后通过基因表达量变化研究两基因之间的相互作用关系。以敖汉细毛羊为研究对象,采集30日龄的胎羊。首先,通过RNA的提取反转录成cDNA参照GenBank中Hoxa5、BMP6基因序列和pcDNA3.1序列分别设计1对含有同源臂的引物,通过PCR反应扩增获得Hoxa5、BMP6基因片段、利用SoSo试剂盒将目的片段连接到p...
旨在构建干扰胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor-II,IGF-II)的重组质粒载体,研究IGF-II对牦牛睾丸支持细胞的影响。本研究设计并合成针对牦牛IGF-II的shRNA寡核苷酸,并将其克隆至pLKO.1质粒载体上,转染牦牛睾丸支持细胞后经嘌呤霉素筛选获得稳定的细胞株,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法检测IGF-II基因和蛋白的表达...
日前,中国水产科学研究院长江水产研究所马杰、曾令兵等发明的“一种慢病毒转染鱼类或两栖类细胞系的方法”获国家发明专利授权,专利号为ZL201510459345.8。该发明公开了一种慢病毒转染鱼类或两栖类细胞系的方法。相关技术方案为:在慢病毒感染目的细胞中使用Lipofectamine 2000,目的细胞系被感染后,培养温度呈梯度变化,具体为30-32℃ 2h、26-8℃ 2h、20-25℃持续培养。...
探讨转染胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠脊髓损伤后神经轴突再生的影响。方法:取SD雌性大鼠的双侧股骨,冲洗髓腔分离培养得到的BMSCs,通过荧光素标记技术检测细胞表面标志物CD29、CD90、CD34、CD45,以确认是否得到BMSCs。构建GDNF过表达慢病毒用以感染BMSCs,加入感染分数分别为10、50、80、100、150、200的重组...
载BDNF基因PEG-PLGA纳米微球的制备及其转染外源性神经干细胞的研究
纳米微球 神经干细胞 基因治疗 转染
2020/6/11
构建转染后能表达神经修复功能蛋白的载脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)基因的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸纳米微球[poly(ethylene glycol)-poly(lactin-co-glycolic acid)-BDNF-nanoparticles,PEG-PLGA-BDNF-NPs];探讨其转染外源性神经干细胞(neural s...
北京航空航天大学常凌乾、樊瑜波教授团队在《Trends in Biotechnology》发表综述:可穿戴生物芯片在单细胞传感和基因转染中的应用(图)
北京航空航天大学 常凌乾 樊瑜波 可穿戴生物芯片 单细胞传感 基因转染
2019/4/17
柔性可穿戴生物医学芯片目前主要可应用于皮肤或器官生理信号传感器、透皮给药、在体基因转染(图1)。近年来,微纳米技术的发展,使可穿戴传感器在单细胞精度上进行长时间、实时生理参数的检测。另一方面,基于微纳米结构的在体透皮递送系统可以实现精确分子递送,包括小分子(如葡萄糖等)和大分子(如蛋白,质粒等)。最新报道的一些纳米转染芯片可以有效地表贴于皮肤上,并在单细胞精度上进行基因转染。与常规方法相比,纳米芯...
通过慢病毒将血管内皮生长因子(VEGF)基因转染于人脂肪干细胞(HADSCs),检测其上清液(CM)中生长因子的表达,并用其上清液作用于人皮肤成纤维细胞(HDFs)及人脐静脉内皮细胞(HUVECs),观察对这2种细胞活力和迁移的影响。方法:准备HADSCs、HDFs及HUVECs 3种细胞并鉴定;将携带VEGF165基因的慢病毒转染于HADSCs,定时收集上清液;ELISA法检验上清中生长因子分泌...
目的:RNA干扰DEK基因表达对舌鳞状细胞癌(简称鳞癌)细胞增殖凋亡的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测舌鳞癌组织中DEK基因的表达;体外培养人舌鳞癌细胞系Tca8113和CAL-27,将合成的阴性对照小干扰RNA(siRNA,阴性对照组)及DEK-siRNA(转染组)转染至细胞,不经特殊处理的细胞为空白对照组,分别在转染48 h后,用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、流式细胞术...
国际权威期刊 Nature Communications(《自然•通讯》)在线发表化学与分子科学学院周翔教授团队和邓鹤翔教授团队在MOF(Metal-organic framework,金属有机框架材料)及DNA领域的合作研究成果。该工作报道了新型介孔MOF材料的设计合成及生物应用拓展,首次实现了单链DNA在非病毒载体中大量负载、精确保护及高效释放,并采用最具挑战的免疫细胞验...
双基因转染犬骨髓间充质干细胞复合HA/ZrO2生物材料新型组织工程骨的构建及其体外成骨能力的研究
组织工程 骨 间充质干细胞 骨髓 基因,修饰 骨形态发生蛋白质2 血管内皮生长因子
2016/12/12
目的 构建骨形态发生蛋白2(BMP-2)、血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)双基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合羟基磷灰石复合二氧化锆(HA/ZrO2)生物材料的新型组织工程骨,并观察该组织工程骨在体外的成骨能力。方法 采用有机泡沫作为模版,干铺烧制法制备新型的蜂窝状HA/ZrO2梯度生物材料,电镜观察新型生物材料的表面特性,生物力学试验机检测其力学性能。采取1岁龄健康beag...
腺病毒介导的hVEGF基因转染细胞修复大鼠放射性皮肤溃疡的效果研究
人血管内皮细胞生长因子 转染 损伤修复
2016/1/21
评价转染人血管内皮生长因子165(hVEGF 165)重组腺病毒载体的成纤维细胞体外表达状态及转染细胞修复放射性皮肤溃疡的效果。方法 构建hVEGF165基因过表达重组腺病毒载体,转染大鼠原代成纤维细胞,通过荧光定量PCR、免疫细胞化学和Western blot观察hVEGF165体外过表达状态;清洁级SD雄性大鼠24只,50 Gy γ射线局部照射,照后7 d于受照局部注射转染hVEGF165细胞...