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siRNA沉默POLE2基因表达对非小细胞肺癌细胞增殖的影响
慢病毒转染 基因 非小细胞肺癌 RNA干扰
2020/7/29
构建DNA聚合酶εB亚基(POLE2)基因重组慢病毒载体，并检测其在非小细胞肺癌(NSCLC)中的功能。方法：RT-PCR技术检测POLE2基因在A549、NCI-H1975、NCI-H1299细胞中的表达。设计并合成针对POLE2 siRNA靶序列的寡核苷酸单链，退火、酶切后产生GV115-shPOLE2慢病毒载体。该载体含有绿色荧光蛋白（GFR），经聚合酶链式反应(PCR)筛选出阳性克隆并测序...
siRNA Targeted to p53 Attenuates Ischemic and Cisplatin-Induced Acute Kidney Injury
acute kidney injury siRNA
2014/12/11
Proximal tubule cells (PTCs), which are the primary site of kidney injury associated with ischemia or nephrotoxicity, are the site of oligonucleotide reabsorption within the kidney. We exploited this ...
研究siRNA CD31靶向沉默血管内皮细胞中血小板内皮细胞黏附分子1（platelet endothelial cell adhesion molecule 1， PECAM-1 ）基因对鼠源性血管内皮瘤（murine hemangioendothelioma，EOMA）细胞增殖及其VEGF表达的影响。 方法: 实验分为裸siRNA CD31组、siRNA CD31-FAM组、稳定阴性对照 （S...
采用siRNA干扰技术沉默人非霍奇金淋巴瘤Raji细胞中Pokemon基因，观察Raji细胞增殖活性的变化，并探讨其可能的分子机制。方法 构建靶向Pokemon基因的siRNA重组慢病毒载体并转染Raji细胞。采用实时定量PCR法和Western blotting法检测Raji细胞Pokemon基因的沉默效果，在Raji细胞中沉默Pokemon基因的表达后采用实时定量PCR法和Western ...
通过siRNA（RNAi）干扰选择性下调TLR4基因的表达，探讨高糖对大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）Toll样受体4（toll-like receptor 4，TLR4）及其转接子髓分化因子88（myeloid differentiation factor 88，MyD88）和炎性因子分泌的影响。 方法 设计并合成3对针对大鼠TLR4基因的特异性siRNA片段，以带有红色荧光的BLOC...
SIRT3 siRNA对ox-LDL刺激的人主动脉内皮细胞ICAM-1、E-selectin表达的影响
SIRT3 siRNA 人主动脉内皮细胞 细胞间黏附分子-1 E-选择素 氧化型低密度脂蛋白
2014/6/4
探讨SIRT3基因对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL)刺激的人主动脉内皮细胞（HAEC)炎性因子细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、E-选择素（E-selectin）表达的影响。方法 将生长状态良好的细胞随机分为空白对照组、转染试剂对照组、阴性对照组及SIRT3 siRNA（1、2、3、4）组。筛选出最佳序列后，细胞分为空白对照组、siRNA组、（20、30、40μg/mL）ox-LDL组、si...
Apollon siRNA联合川芎嗪对白血病细胞增殖及凋亡的影响
Apollon基因 RNA干扰 川芎嗪 白血病K562细胞
2014/11/10
观察Apollon siRNA 靶向沉默Apollon 基因联合川芎嗪（TMP）对人慢性粒细胞白血病细胞株K562 增殖及凋亡的影响。方法 根据前期实验筛选出的干扰效果最佳的Apollon siRNA 片段，构建pGPHIGFP-Neo-Apollon 真核表达载体，并将构建成功的载体转染至K562 细胞。将实验分为细胞对照组（未行任何处理）、阴性对照组（转染阴性质粒载体）和RNA 干扰组（转染p...
观察信号转导与转录激活子1（STAT1）siRNA转染后高糖培养人肾小球系膜细胞(HMC)的增殖情况及细胞内STAT1、磷酸化（p）STAT1、STAT3、p-STAT3蛋白及下游TGF-β1的表达变化，探讨高糖状态下STAT1和STAT3活性变化及STAT亚型变化对TGF-β1的影响。 方法 设计并合成针对STAT1基因的3个特异性siRNA序列（STAT1-siRNA），应用Lipofe...
通过构建NALP3?siRNA，观察其抑制大鼠肾小管上皮细胞（NRK?52E）NALP3表达的作用，探讨其对细胞缺氧复氧（HR）损伤的保护作用。 方法 （1）利用三气培养箱调整氮气压力条件形成缺氧条件，缺氧1 h，按复氧时间设复氧后1、2、4、8、16、24 h组，分别检测细胞培养上清液中的乳酸脱氢酶（LDH）含量以及细胞NALP3蛋白的表达。（2）NRK?52E转染NALP3?siRNA质粒...
CD147-siRNA对甲状腺乳头状癌K1细胞侵袭能力的影响
RNA干扰 CD147 MMP7 肿瘤侵袭
2013/12/25
研究小干扰RNA对人甲状腺乳头状癌K1细胞CD147表达及细胞侵袭能力的影响，并筛选出有效的siRNA序列。方法 人工设计合成3对CD147-siRNA，并将CD147-siRNA转染人甲状腺乳头状癌K1细胞来沉默CD147基因的表达。用RT-PCR、ELISA分别测定CD147 mRNA和其蛋白的表达，从而验证CD147-siRNA的干扰效果；用 RT-PCR、Western blot技术分别测...
探讨RNAi技术经慢病毒载体介导的siRNA对Jiyoye细胞c-myc基因表达的抑制作用。方法 设计并合成RNA干扰序列,退火后连接到pLVX干扰载体上，构建PLVX-c-myc表达载体,经慢病毒介导转染人Jiyoye细胞株培养72h。实验分为空白对照（未转染）、c-myc-neg、c-myc-1、c-myc-2、c-myc-3组。采用流式细胞术检测各组细胞转染率，采用real-time...
siRNA干扰CHRNA5基因的表达抑制尼古丁对人肺癌细胞的促增殖作用
α5-尼古丁乙酰胆碱受体 siRNA 肺癌 尼古丁 增殖
2012/5/17
研究siRNA干扰尼古丁乙酰胆碱受体α5（cholinergic receptor nicotinic alpha 5, CHRNA5 ）基因表达后对尼古丁促人肺癌A549细胞增殖作用的影响。 方法： 设计并合成CHRNA5-siRNA片段，并经脂质体介导转染A549细胞。荧光定量PCR、Western blotting检测转染后A549细胞中 CHRNA5 mRNA和蛋白的表达，MTT法检测C...
siRNA沉默Livin基因对胃癌细胞生长、凋亡的影响
siRNA沉默 Livin基因 胃癌细胞生长
2009/6/26
目的: 观察小分子干扰RNA(siRNA)沉默Livin基因在胃癌BGC-823细胞中的表达, 并探讨Livin基因对胃癌细胞生长、凋亡的影响.
方法: 自行设计两条针对Livin基因的siRNA: Livin-sh-1和Livin-sh-2, 以此构建相应的表达载体并分别转染至对数生长期胃癌BGC-823细胞, 经G418筛选后分别采用半定量RT-PCR检测不同siRNA实验分组细胞BGC-8...
靶向Skp2基因siRNA对大肠癌细胞生物学特性的影响
靶向Skp2基因siRNA 大肠癌细胞 生物学特性
2009/6/26
目的: 设计和构建Skp2特异性的siRNA真核表达载体, 观察Skp2siRNA重组体对人大肠癌HCT116细胞株生物学特性的影响. 方法: 人工合成Skp2基因干扰序列并定向插入到RNAi真核表达载体pRNAT-U6.1/Neo, 通过测序鉴定. 用脂质体介导的基因转染方法转入HCT116细胞, 经G418筛选出稳定转染的细胞系, 半定量RT-PCR方法检测靶基因的表达. 流式细胞技术分析细胞...
目的: 探讨黏蛋白5AC特异性siRNA对人肝内胆管癌细胞珠HCCC-9810体外增殖及凋亡能力的影响. 方法: 设计合成三对特异性siRNA, 构建了三个可在哺乳动物细胞中表达siRNA的表达质粒, pRNAT-U6.1/Neo-MUC5AC-siRNA1/2/3, 应用脂质体转染技术分别将三个稳定表达的质粒和对照质粒(空质粒对照)转染HCCC-9810, 应用有荧光标记的非特异性小分子的siR...