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探讨雷诺丁受体1(RYR1)表达下调对小鼠成肌细胞C2C12中线粒体的影响及其发生机制。方法:采用小干扰RNA(siRNA)敲减C2C12细胞的RYR1表达,应用透射电镜对线粒体进行体视学分析,观察细胞内线粒体数目和形态学的改变,应用real-time PCR和Western blot方法检测线粒体融合蛋白2(Mfn2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)和细胞外信号调节激...
探讨HPV16E6 siRNA联合5-Aza-CdR(5-aza-2'-deoxycytidine,5-氮-2'-脱氧胞苷,又称地西他滨)对宫颈癌SiHa细胞中E-钙黏蛋白表达和基因甲基化的影响。方法:采用SiHa细胞构建的HPV16E6 沉默细胞株及5-Aza-CdR细胞株,检测细胞中E-cadherin mRNA和蛋白表达,以及E-cadherin甲基化状态。采用细胞黏附、Transwell体...
siRNA干扰PTX3基因对子宫内膜癌细胞增殖的影响
PTX3 细胞增殖 AKT通路 子宫内膜癌
2020/8/7
探讨siRNA干扰PTX3基因在子宫内膜癌组织中的表达及其对子宫内膜癌细胞增殖的影响。方法:实时荧光定量PCR法检测子宫内膜癌组织中PTX3基因的表达。MTT法检测人子宫内膜癌RL95-2细胞增殖能力。流式细胞术检测RL95-2细胞周期分布。Western blot检测RL95-2细胞PTX3、p-AKT和AKT蛋白表达水平。
观察白介素-1β(IL-1β)小干扰RNA(siRNA)对脊髓钝挫伤(spinal cord contusion,SCC)大鼠运动功能的影响,并探讨其相关机制。方法:98只雌性SD大鼠随机分为4组:假手术组(Sham组)、单纯SCC组(SCC组)、空载体组(Vector组)和慢病毒干扰组(IL-1β SH组)。IL-1β SH组和空载体组术前48h在拟损伤脊髓节段局部注射IL-1β siRNA或空...
探讨siRNA沉默CD44表达对人胆囊癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法利用RNA干扰技术在人胆囊癌细胞株EH-GB1和GBC-SD中敲低CD44的表达;通过CCK8实验检测si-NC和si-CD44对人胆囊癌细胞株EH-GB1和GBC-SD增殖能力的影响;通过Transwell迁移实验检测其对迁移能力的影响;通过Transwell侵袭实验检测其对侵袭能力的影响。
采用siRNA技术沉默IFITM1基因表达,观察对卵巢癌CP70细胞侵袭及凋亡能力的影响及其可能的分子机制。方法:利用脂质体转染法将靶向IFITM1的小干扰RNA转染卵巢癌CP70细胞株;Western blot检测CP70细胞IFITM1蛋白的表达;Transwell侵袭小室、MTT、流式细胞仪检测转染细胞侵袭力、顺铂敏感性和凋亡的变化;Western blot观察转染后CP70细胞caspas...
探讨siRNA抑制抑制Nox2在阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤中的作用及机制。方法:建立阿霉素致人皮肤成纤维细胞损伤模型,检测阿霉素处理的细胞中Nox2蛋白质的表达。根据实验设计分为正常组,单纯的siRNA-Nox2转染组,阿霉素模型组及siRNA-Nox2转染+阿霉素处理组。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)试剂盒检测细胞氧化应激...
siRNA干扰S100A4蛋白引起钙离子信号改变后对人胃癌细胞的影响
胃癌 S100A4 siRNA Ca2+
2020/8/3
探讨siRNA干扰S100A4蛋白引起钙离子信号改变后对人胃癌细胞的影响。方法:利用lip2000将siRNA-NC和siRNA-S100A4转染进胃癌细胞SGC-7901和MGC-803中。S100A4的基因表达的变化由qRT-PCR检测验证;细胞增殖能力的改变通过MTT、细胞克隆、细胞凋亡实验检测。侵袭和迁移能力的改变利用Transwell实验和细胞划痕实验检测;采用荧光探针Fura-2 乙酰...
研究针对大鼠内皮素受体A(ETaR)的小干扰核糖核酸(siRNA)通过改变肾脏局部免疫微环境减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)的作用。雄性SD大鼠40只,采用随机数字表法将大鼠平均分为4组。假手术组:仅切除大鼠右肾,不建立左肾IRI模型。IR组:切除大鼠右肾后建立左肾IRI模型。阴性siRNA组(阴性对照组)和ETaR siRNA组(实验组):操作同IR组,在左肾缺血时分别经左肾静脉逆行高压灌注...
研究慢病毒介导Rac1沉默对增生期血管瘤内皮细胞内质网应激及Caspase-12活化水平的影响。方法:用Rac1 siRNA慢病毒载体和阴性对照慢病毒载体感染人增生期血管瘤内皮细胞,用Realtime PCR和Western blot检测细胞中Rac1表达变化。MTT法测定细胞增殖能力,PI单染法检测细胞周期变化,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡变化,Western blot检...
siRNA沉默POLE2基因表达对非小细胞肺癌细胞增殖的影响
慢病毒转染 基因 非小细胞肺癌 RNA干扰
2020/7/29
构建DNA聚合酶εB亚基(POLE2)基因重组慢病毒载体,并检测其在非小细胞肺癌(NSCLC)中的功能。方法:RT-PCR技术检测POLE2基因在A549、NCI-H1975、NCI-H1299细胞中的表达。设计并合成针对POLE2 siRNA靶序列的寡核苷酸单链,退火、酶切后产生GV115-shPOLE2慢病毒载体。该载体含有绿色荧光蛋白(GFR),经聚合酶链式反应(PCR)筛选出阳性克隆并测序...
慢病毒介导siRNA干扰CEP55表达对卵巢癌细胞生物学行为的影响
慢病毒 中心体相关蛋白55 卵巢癌 生物学行为
2018/9/21
本文通过慢病毒介导siRNA干扰卵巢癌SKOV3细胞中心体相关蛋白55(CEP55)表达,以观察其对细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等生物学行为的影响。实验分为CEP55组(转染CEP55 siRNA慢病毒)、阴性对照组(转染不含CEP55 siRNA的慢病毒)和空白对照组(不处理)。结果显示:CEP55 siRNA慢病毒转染效率为(89.4±4.7)%,CEP55组CEP55的mRNA和蛋白表达显著降...
siRNA Targeted to p53 Attenuates Ischemic and Cisplatin-Induced Acute Kidney Injury
acute kidney injury siRNA
2014/12/11
Proximal tubule cells (PTCs), which are the primary site of kidney injury associated with ischemia or nephrotoxicity, are the site of oligonucleotide reabsorption within the kidney. We exploited this ...
探讨Notch1 siRNA对体内外人骨髓瘤细胞RPMI-8226细胞硼替佐米药物敏感性的影响。方法 体外采用Notch1 siRNA转染RPMI-8226细胞,CCK-8实验检测细胞增殖及硼替佐米药物的敏感性;Western blot检测各组细胞Notch1蛋白表达变化;将RPMI-8226细胞皮下注射于NOD/SCID小鼠,建立人多发性骨髓瘤(MM)小鼠移植瘤模型,将成瘤小鼠分为三组:NS+b...