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中国医学科学院医学实验动物研究所实验动物资源研究中心的基因工程技术课题组,一直致力于利用基因工程修饰技术进行心肌病动物模型的创制及相关致病基因功能研究,近期,在DNA甲基化酶基因功能相关研究中取得新进展,研究成果发表在Laboratory Investigation 杂志。
DNA甲基化基因DNMT1的研究进展
DNMT1 DNA甲基化 表达调控 肿瘤
2020/8/5
DNA甲基转移酶1(DNMT1)是哺乳动物基因组表观遗传修饰中DNA甲基化的关键基因,其编码的蛋白是一种分子量大且功能复杂的酶,具有多种调控功能,参与机体发育过程中干细胞生长、细胞增殖、器官发育、衰老和肿瘤发生等多个生物学过程。本文将对DNMT1基因的结构与分子作用机制进行介绍,并总结其表达调控、生物学功能及其与肿瘤等人类疾病相关的研究进展。
DNA甲基化是最早发现的表观遗传修饰途径之一,参与许多重要的细胞过程,如基因组印记、X染色体灭活、转录抑制、胚胎发育等,与精神分裂症、Rett综合征、肿瘤等多种疾病的发生和发展密切相关。DNA甲基转移酶(DNA Methyltransferase, DNMT)蛋白家族负责催化和维持DNA甲基化,研究人员在多种肿瘤组织中,发现 DNMT 表达异常。因此,DNMT 被认为...
探索三氯生诱导的肝肿瘤的可能作用机制。方法 高浓度(1.25, 2.5, 5,和10 μmol·L-1)和环境相关浓度(0.625~5 nmol·L-1)三氯生分别暴露HepG2细胞24 h和2周,其中恢复实验选择5 nmol·L-1暴露组细胞在正常培养液中继续培养2周。① 利用HPLC-MS/MS检测全基因组DNA甲基化的改变和8-OHdG的水平变化,DNA甲基化抑制剂5-AZA暴露为阳性对照;...
检测DNA甲基化转移酶DNMT1,DNMT3a, DNMT3b在子宫内膜异位症(dendometriosis, EMs)异位内膜、在位内膜及正常对照子宫内膜的表达。方法:收集子宫内膜异位症巧克力囊肿20例为实验组,行输卵管吻合术者、宫颈病变行手术者20例为对照组,抽提总RNA,反转录制备cDNA。采用real-time RT-PCR 检测DNMT1,DNMT3a及DNMT3b基因的表达,并通过免疫...
RNAi重组体抑制胃癌细胞AGS中DNMT1基因的表达
RNAi重组体 胃癌细胞 AGS DNMT1基因
2009/7/28
目的: 利用RNA干扰(RNA interfering,RNAi)技术,以DNMT1(DNA methyltransferase 1)为靶基因,设计构建重组体,研究其对胃癌细胞AGS中DNMT1表达的抑制作用.方法: 设计有小发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,再克隆至载体pTZU6+1中构建重组体,经鉴定正确后,转染胃癌细胞AGS,最后使用RT-PCR法定性分析DNMT1的mRNA水平和...
siRNA沉默DNMT1对人乳腺癌细胞MCF-7生长的影响
DNMT1 RNA干扰 乳腺癌 MCF-7
2013/12/30
靶向人DNMT1(DNA methyltransferase 1, DNMT1)构建RNA干扰载体,研究其对乳腺癌细胞周期、增殖及凋亡的影响。方法 靶向DNMT1基因设计三条短发夹状RNA(short hairpin RNA, shRNA) 的寡核苷酸片段,构建重组体pGCsi-DNMT1,转染至乳腺癌细胞株MCF-7,定量PCR 法检测DNMT1 mRNA表达水平;流式细胞技术分析细胞周期的变化...
siRNA沉默DNMT1对人乳腺癌细胞MCF-7生长的影响
DNMT1 RNA干扰 乳腺癌 MCF-7
2013/12/30
靶向人DNMT1(DNA methyltransferase 1, DNMT1)构建RNA干扰载体,研究其对乳腺癌细胞周期、增殖及凋亡的影响。方法 靶向DNMT1基因设计三条短发夹状RNA(short hairpin RNA, shRNA) 的寡核苷酸片段,构建重组体pGCsi-DNMT1,转染至乳腺癌细胞株MCF-7,定量PCR 法检测DNMT1 mRNA表达水平;流式细胞技术分析细胞周期的变化...
目的: 探讨不同结肠癌细胞系中表观遗传学酶谱的表达水平. 方法: RT-PCR分别检测结肠癌细胞系HT-29、Lovo和Caco-2中Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b和HMT mRNA表达水平. 结果: Dnmt3b mRNA在结肠癌细胞系HT-29、Lovo中高度表达, Dnmt1与HMT次之, Dnmt3a表达水平最低; Dnmt3b、Dnmt3a在不同结肠癌细胞系之间的表达水平存在显著...