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靶向鸭肠炎病毒NP基因RNAi对DEV增殖的影响
鸭肠炎病毒 核衣壳蛋白 RNA干扰 荧光定量PCR
2017/3/14
为探究核衣壳蛋白(NP)对鸭肠炎病毒(DEV)增殖的影响,笔者根据GenBank上DEV-NP基因序列,设计并构建pSilencer-DEV-NP,采用三种不同方式处理转染鸭胚成纤维(DEF)细胞后,应用荧光显微镜法和FQ-PCR法分析pSilencer-DEV-NP对DEV增殖的影响,结果显示:经荧光显微镜法观察,pSilencer-DEV-NP-l~4在DEF细胞中均呈现绿色荧光;FQ-PCR...
逆转录病毒载体RNAi技术抑制猪瘟病毒在猪胚胎成纤维细胞的增殖
猪瘟病毒 猪胚胎成纤维细胞 RNA干扰 逆转录病毒载体
2009/7/20
摘要:利用针对猪瘟病毒(Classical swine fever virus , CSFV)石门株Npro基因mRNA的shRNA逆转录病毒表达载体,转导猪胚胎成纤维细胞,在G418的筛选压力下,获得7个稳定整合shRNA表达构件的猪胚胎成纤维细胞株。以100TCID50的CSFV分别感染96孔板内的上述细胞克隆,72h后以对感染细胞克隆的进行间接免疫荧光分析及子代病毒滴度检测,结果显示,在所获...